Informações

Disciplina: Bioprocessos Cultivo Celular [cultivo: Animal] - 2025/1
Professor(a): Marianna Boia Ferreira
Atividade: Protocolo prática 1
Deadline: 2025-03-21T00:00:00.000-03:00
Integrantes: Matheus de Lara Szajda,Heitor Torres Zacharow,Javerson Goulart Filho,Guilherme Baran Sinhori
Código de envio blackboard: e5a023b6a06c442ca032a4acdfe1ec19

Protocolo

Para a realização desta prática foram necessários os seguintes materiais e reagentes:

• Tubo Falcon de 50 mL;
• Tubo Falcon de 13,5 mL;
• Pipetas Pasteur esterilizadas;
• Placa de Petri esterilizada com suporte para células animais;
• Centrífuga;
• Banho de aquecimento;
• Estufa de cultivo;
• Meio DMEM;
• Soro fetal bovino;
• Etanol 70%;
• Células congeladas em nitrogênio líquido.

O experimento foi iniciado com a preparação do meio de cultura celular, sendo adicionados 45 mL de meio DMEM e 5 mL de soro fetal bovino a um tubo Falcon de 50 mL. Deste tubo, uma alíquota de 5 mL foi transferida para um tubo Falcon de 13,5 mL. Na sequência, escolheu-se um pellet aleatório do reservatório refrigerado em nitrogênio líquido, o qual continha células B16-F10. O pellet foi submerso no banho de aquecimento e foi transferido para o tubo Falcon de 13,5 mL assim que começou o desgelo. O tubo foi homogeneizado e centrifugado a 1.000 G por 2 minutos, o sobrenadante foi descartado e foram adicionados 8 mL do meio do tubo Falcon de 50 mL. Com uma pipeta de Pasteur esterilizada, foi feita a homogeneização do meio e ele foi vertido em uma placa de Petri esterilizada com suporte para células animais. A placa foi identificada e levada à estufa de cultivo em temperatura de 37 °C.